FISH检测（荧光原位杂交）的临床意义与应用

FISH（Fluorescence In Situ Hybridization）是一种基于荧光标记的DNA探针与靶序列特异性结合的分子细胞遗传学技术，可在细胞或组织原位检测特定基因或染色体异常。其高灵敏度、特异性和直观性使其在临床诊断、预后评估及治疗指导中广泛应用。

1. 技术原理

• 核心步骤：

1. 样本制备：细胞（血液、骨髓、实体瘤组织等）或石蜡包埋组织切片。
2. 探针标记：荧光染料标记的DNA探针（针对特定基因或染色体区域）。
3. 杂交：探针与靶DNA序列结合。
4. 荧光显微镜观察：通过荧光信号判断靶序列的拷贝数、位置或结构异常。

• 优势：
  • 不依赖细胞分裂，可检测间期细胞。
  • 可定位异常至特定细胞区域（如肿瘤细胞）。
  • 灵敏度高（可检测微小缺失、扩增或易位）。

2. 临床应用领域

（1）肿瘤诊断与分型

• 血液系统肿瘤：
  • 慢性髓系白血病（CML）：检测BCR-ABL1融合基因（t(9;22)）。
  • 急性白血病：
    • PML-RARA（急性早幼粒细胞白血病，APL）。
    • RUNX1-RUNX1T1（急性髓系白血病，AML）。
  • 多发性骨髓瘤：检测1q21扩增、17p缺失等高危因素。
• 实体瘤：
  • 乳腺癌：HER2基因扩增检测（指导曲妥珠单抗靶向治疗）。
  • 胃癌/食管癌：HER2状态评估。
  • 神经母细胞瘤：MYCN基因扩增（预后不良标志）。
  • 膀胱癌：检测3/7/17号染色体及9p21缺失（尿脱落细胞辅助诊断）。

（2）遗传病与产前诊断

• 染色体微缺失综合征：
  • 22q11.2缺失（DiGeorge综合征）。
  • 15q11-13缺失（Prader-Willi/Angelman综合征）。
• 产前诊断：
  • 羊水/绒毛膜细胞检测常见非整倍体（如21三体、18三体）。
  • 嵌合体分析（如性染色体异常）。

（3）其他应用

• 病原体检测：如HPV分型（宫颈脱落细胞中高危型HPV感染）。
• 移植后嵌合体监测：供体与受体细胞比例分析（如骨髓移植）。

3. 检测结果解读与临床意义

（1）基因扩增（如HER2）

• 阳性：提示靶向治疗敏感（如乳腺癌HER2扩增患者使用曲妥珠单抗）。
• 阴性：避免无效治疗及副作用。

（2）基因缺失（如17p缺失）

慢性淋巴细胞白血病（CLL）：17p缺失（TP53基因）提示化疗耐药，需选择BTK抑制剂（如伊布替尼）。

（3）染色体易位（如BCR-ABL1）

• CML诊断标志：指导酪氨酸激酶抑制剂（如伊马替尼）的使用及疗效监测。

4. 与其他技术的比较

技术	优势	局限性
FISH	定位精准、可检测未知融合伴侣	仅能检测已知靶点，通量低
PCR	高灵敏度、快速检测已知突变	需已知突变位点，无法检测大片段缺失/扩增
NGS	高通量、多基因同步分析	成本高、数据分析复杂、无法定位细胞原位异常
核型分析	全基因组筛查染色体结构异常	分辨率低（5-10 Mb）、依赖细胞分裂

5. 局限性及注意事项

• 探针设计限制：仅能检测预定的靶点，可能漏检罕见变异。
• 样本要求：
• 需足够细胞量及良好保存（避免DNA降解）。
• 石蜡切片需控制脱蜡和蛋白酶处理条件。
• 结果判读：
  • 需区分肿瘤异质性（如HER2扩增的瘤内异质性）。
  • 部分病例需结合IHC（免疫组化）或NGS验证。

6. 适用人群

• 疑似血液肿瘤或实体瘤患者（需分子分型或预后评估）。
• 遗传病高风险胎儿（产前诊断）或儿童（发育异常排查）。
• 靶向治疗前筛选（如HER2阳性乳腺癌、ALK融合肺癌）。

总结

FISH检测是连接细胞遗传学与分子病理学的桥梁技术，在肿瘤精准诊疗、遗传病诊断及产前筛查中不可或缺。其直观、快速的特点使其成为临床一线的重要工具，但需结合患者病史、其他检测技术（如NGS）综合判断，以实现个体化医疗决策。

如需专业咨询，请联系我们,我们提供免费专业服务。电话: 175 2100 6465